2024 EHA | 李春蕊教授：聚焦中国原研力量，EBV相关血液肿瘤治疗领域焕发新活力

问题1：据目前研究发现，EBV可能通过哪些机制诱导血液肿瘤的发生及恶性转化？对于EBV阳性的血液肿瘤，KSD-101疫苗主要作用于哪些关键环节，如何带来潜在治疗获益？

EBV与宿主细胞之间的相互作用非常复杂，经过几十年的研究，其促进肿瘤发生及恶性转化的确切机制仍不完全清楚。研究发现，EBV在其生命周期中可采用不同的策略来逃避宿主的免疫反应，并损害固有和适应性免疫，涉及机制包括遗传和表观遗传改变、抑制凋亡、增强细胞增殖以及抑制对EBV感染细胞的免疫识别等^1-2。

近年来，越来越多的研究聚焦于肿瘤微环境和免疫逃逸机制在EBV诱发恶性肿瘤中的作用，并从中探寻EBV相关恶性肿瘤的潜在治疗方法。免疫系统在控制EBV相关恶性肿瘤方面有着重要作用。EBV可通过改变肿瘤微环境中免疫细胞的数量和浸润，调节免疫检查点以及特定细胞因子的表达，形成免疫抑制微环境，促进肿瘤的生长。

目前，基于免疫的肿瘤特异性治疗正在临床研究中进行评估¹。本次研究采用的KSD-101疫苗即为一种免疫细胞疗法，KSD-101是负载EBV相关抗原的自体树突状细胞（DC）疫苗，通过诱导DC对肿瘤的特异性免疫功能，增强机体对肿瘤细胞的攻击能力，从而达到抑制肿瘤生长和扩散的目的。

2024年3月30日，KSD-101获得美国食品药品监督管理局（FDA）授予新药临床试验（IND）许可。本次EHA大会上公布的I期探索性临床试验中，KSD-101治疗EBV相关血液肿瘤患者的耐受性、安全性以及相关免疫反应已得到初步验证³，这为后续临床进一步的开发和探索提供了有效依据。

问题2：这项有关KSD-101临床试验的开展主要是为了解答哪些关键性科学问题？为此，研究分别设置了哪些观察指标，如何综合评估这些指标以寻找适合于临床试验的给药方案？

本次研究为I期探索性试验，为KSD-101用于EBV相关血液肿瘤治疗的首次人体研究，主要目的是评估KSD-101作为一种新型细胞药物的安全性与初步疗效，并为后续研究中的给药方案等提供重要基础。

试验中，入组患者接受每2周1次皮下注射KSD-101单药治疗，共接种3~5剂。研究采用了3+3剂量爬坡设计，以评估每个剂量组的剂量限制性毒性(DLT)，并确定最大耐受剂量(MTD)。试验中先后设定两个剂量水平组（5.0×10⁶细胞/剂及7.5×10⁶细胞/剂），基于安全性、初步疗效和可行性评估，取消了第3剂量组水平，并扩增5.0×10⁶剂量组样本。

本次研究的主要终点为耐受性、安全性、每个剂量组的DLT和MTD，观察不同剂量组不良事件(AE)和严重不良事件(SAE)的类型和发生率，包括注射后发生的不良事件、与研究药物相关的不良事件或导致退出研究的事件。次要终点为KSD-101临床疗效，包括注射DC疫苗后1年的EBV-DNA载量、客观缓解率(ORR)、疾病控制率(DCR)、反应持续时间 (DOR)、无进展生存期(PFS)、总生存期(OS)等，以及注射后的免疫反应，监测外周血中EBV特异性CD8⁺ T细胞、B细胞、NK细胞、免疫抑制性调节性T细胞（Tregs）等水平变化。本次公布的试验结果为疫苗注射后84天内的观察结果。

问题3：本次研究主要获得了哪些关键性核心数据？从研究预设的终点指标来看，您认为本次试验结果是否达到预期？

截至2023年10月30日，已有9例患者接受了至少3剂KSD-101治疗。在剂量递增时，3例患者接受5.0×10⁶细胞/剂，2例患者接受7.5×10⁶细胞/剂，所有患者对疫苗的耐受性良好。KSD-101的相关不良事件主要包括1-2级发热、1级注射部位反应、淋巴结肿大以及淋巴细胞计数增加，程度均较轻，未发现与药物相关的3级以上不良反应和DLT。

在临床疗效方面，9例患者中除1例因早期疾病复发被排除、1例因诊断不明而未被纳入、2例尚未达到疗效评估时间外，其余5例可评估疗效的患者均在注射KSD-101疫苗12周期间达到临床完全缓解（CR），CR和ORR为100%。

本次试验结果与预期相符——KSD-101被初步证明具有良好的安全性和有效性，是一种非常有前景的EBV相关血液肿瘤治疗方法。

问题4：据悉，研究还对疫苗接种前后患者外周血淋巴细胞水平的变化进行了细致观察。您认为这一结果的发现对于理解KSD-101对EBV相关血液肿瘤的治疗作用有何帮助？

KSD-101为患者自体DC疫苗，即从患者外周血中提取单核细胞，在体外培养并在特定细胞因子的刺激下诱导分化为成熟DC，负载EBV相关抗原后经皮下注射回输至患者体内的一种疫苗。DC是人体免疫系统中功能最强的抗原提呈细胞（APC），在触发和调节先天性免疫和获得性免疫反应中发挥关键作用。DC具有强大的抗原摄取和处理能力，能够向初始T细胞呈递肿瘤抗原，刺激抗原特异的细胞毒性T淋巴细胞（CTL）增殖，并利用固有免疫细胞（如NK细胞）的细胞毒活性，引发针对肿瘤细胞的特异性免疫应答。负载EBV相关抗原的DC细胞具备高效识别EBV感染细胞和肿瘤细胞的能力，在体内能够向攻击性免疫细胞（如杀伤性T细胞）传达EBV感染细胞和肿瘤细胞的特征，并加以活化，抑制病毒复制和肿瘤进展，最终清除机体内的肿瘤负荷。因此，KSD-101能够激活自身针对特定肿瘤的特异性免疫应答，同时发挥抗病毒和抗肿瘤的双重治疗作用。

从具体研究结果来看，患者在接种KSD-101疫苗后，外周血中EBV特异性CTL峰值比例显著增加（基线平均0.30% vs. 治疗12周平均2.47%，P＜0.05）；免疫细胞的峰值数量也增加，如B细胞（平均上调27.51倍，P＜0.05）、NK细胞（平均上调1.68倍，P＜0.01）和CD8⁺T细胞（平均上调2.38倍，P＜0.05），而Treg细胞的比例显著减少（平均下降53.05%，P＜0.001）。结果表明，注射KSD-101疫苗后，机体中多种免疫细胞的数量发生显著变化，抗肿瘤免疫应答增强，该变化趋势与其临床疗效高度一致。

因此，结合研究中KSD-101临床疗效以及免疫反应监测结果，可以基本推断出KSD-101疫苗的潜在作用机制——即激活自身免疫系统，增强机体对病毒感染和肿瘤产生的免疫应答反应能力，发挥抗病毒与抗肿瘤效应。这进一步证明了该疗法在EBV相关血液肿瘤中的治疗潜力，有助于我们后续的研发优化及研究监测。

问题5：根据KSD-101研发设计原理以及该临床试验的初步结果，您认为与其他现有治疗方法相比，KSD-101疫苗在治疗EBV相关血液肿瘤中具有哪些应用优势？

针对EBV相关血液系统恶性肿瘤，目前尚无特效治疗方法。迄今为止，放疗和/或化疗等经典方案仍是其临床治疗中的主要选择，但这些疗法仍不足以完全治疗EBV阳性的恶性肿瘤或根除EBV感染细胞¹。

与其他治疗方法（如放化疗、CAR-T细胞疗法）相比，DC免疫治疗利用人体固有的免疫力（免疫细胞）对抗肿瘤，具有主动性免疫、特异性强、持续时间长（建立免疫防护，例如注射疫苗后可促进全身免疫微环境向抗肿瘤状态转变，为后续免疫清除肿瘤创造有利条件）以及副作用小等优点。

负载EBV相关抗原的DCs迁移至肿瘤引流区淋巴结的能力对疫苗效力至关重要，并部分取决于疫苗的给药途径⁴。目前，KSD-101的推荐使用频率和给药途径为每2周1次皮下注射，给药频率相比于化疗周期更短，给药方式相比静脉输入更简便、安全，患者可自行在家中完成，避免因反复住院导致病情恶化的风险，有助于其治疗依从性的提高。

问题6：基于Ⅰ期临床试验所取得的结果，您对KSD-101疫苗产品后续的研发优化以及临床试验的开展有哪些想法和计划？针对KSD-101在EBV相关血液肿瘤中的应用探索，您认为未来可重点关注或研究的方向有哪些？

科学研究表明，DC疫苗的效力可受到多种因素的影响，如DCs类型、EBV相关抗原类型的选择和装载、DCs体外成熟及活化的流程等⁴，从制备过程中的各个环节寻找优化空间，并通过标准化大批量生产，是实现高质量疫苗临床应用的基础。

I期临床试验取得了较为理想的结果，但尚需更大规模的前瞻性研究和更长时间的随访来进一步验证KSD-101的长期临床获益和安全性，并在此基础上更为深入地探索疫苗注射的剂量范围、剂量选择、量效关系特征，确定合适的给药剂量和给药方案。在后续的临床试验中，除扩大样本规模，还需根据具体研究目标设立合理的研究终点、治疗方案(包括合并给药)，细化目标人群（纳入肿瘤类型、严重程度等方面的评价考量) 等，充分评估KSD-101的临床价值，加速其产业化发展。

针对KSD-101疫苗在EBV相关血液肿瘤中的应用，除加快确认其有效性和安全性外，探索其与已建立的治疗方法的潜在协同作用也是挖掘其治疗潜力的重要研究方向。如与免疫检查点抑制剂的联合使用，或联合某些低剂量放化疗方法，通过免疫原性细胞死亡诱导肿瘤相关抗原的释放，可能有助于提高DC疫苗的疗效。